Linja celulare është bërë më e thjeshtë dhe më efikase

1. Zgjedhja e linjës së duhur qelizore
Kur zgjidhni linjën e duhur qelizore për eksperimentin tuaj, ju lutemi merrni parasysh kriteret e mëposhtme:
a.Llojet: Linjat qelizore jo-njerëzore dhe jo-primate zakonisht kanë më pak kufizime biosigurie, por në fund eksperimenti juaj do të përcaktojë nëse do të përdorni një kulturë të një specie të caktuar.
b.Veçoritë: Cili është qëllimi i eksperimentit tuaj?Për shembull, linjat qelizore që rrjedhin nga mëlçia dhe veshka mund të jenë më të përshtatshme për testimin e toksicitetit.
c. E kufizuar ose e vazhdueshme: Megjithëse zgjedhja nga një linjë celulare e kufizuar mund t'ju ofrojë më shumë opsione për të shprehur funksionin e duhur, linjat e vazhdueshme qelizore në përgjithësi janë më të lehta për t'u klonuar dhe mbajtur.
d. Normale ose të transformuara: Linjat qelizore të transformuara zakonisht kanë një shpejtësi më të lartë rritjeje dhe efikasitet më të lartë të mbjelljes, janë të vazhdueshme dhe kërkojnë më pak serum në mjedisin e kulturës, por fenotipi i tyre ka pësuar ndryshime të përhershme përmes transformimit gjenetik.
e.Kushtet dhe karakteristikat e rritjes: Cilat janë kërkesat tuaja për shpejtësinë e rritjes, densitetin e ngopjes, efikasitetin e klonimit dhe aftësinë e rritjes pezull?Për shembull, për të shprehur proteinat rekombinante në rendimente të larta, mund t'ju duhet të zgjidhni linja qelizore që kanë ritme të shpejta rritjeje dhe aftësi për t'u rritur në pezullim.
f. Kritere të tjera: Nëse jeni duke përdorur një linjë celulare të kufizuar, a ka stok të mjaftueshëm në dispozicion?A karakterizohet plotësisht linja qelizore apo duhet ta verifikoni vetë?Nëse jeni duke përdorur një linjë qelizore anormale, a ka një linjë qelizore normale ekuivalente që mund të përdoret si kontroll?A është linja qelizore e qëndrueshme?Nëse jo, sa e lehtë është ta klonosh atë dhe të gjenerosh sasi të mjaftueshme të ngrira për eksperimentin tënd?

2. Merrni linja qelizore
Ju mund të ndërtoni kulturën tuaj nga qelizat primare, ose mund të zgjidhni të blini kultura qelizore të vendosura nga furnizues komercial ose jofitimprurës (dmth. banka qelizore).Furnizuesit me reputacion ofrojnë linja qelizore me cilësi të lartë që janë testuar me kujdes për integritet dhe sigurojnë që kultura të mos ketë ndotës.Ne rekomandojmë të mos huazoni kultura nga laboratorë të tjerë, sepse ato kanë një rrezik të lartë të kontaminimit nga kultura qelizore.Pavarësisht nga burimi i tij, ju lutemi sigurohuni që të gjitha linjat e reja qelizore të jenë testuar për kontaminimin e mikoplazmës përpara se të filloni ta përdorni.